萘胁迫下水稻幼苗抑制差减杂交cDNA文库构建

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从200mg/№萘胁迫水稻幼苗根系中成功分离和纯化了高纯度的总RNA和mRNA,并以无萘处理为Driver,以200mg/Kg的幼苗为Tester,通过eDNA双链的合成及两次PCR扩增,富集到两组处理中差异表达的大小在200~800bp的eDNA序列,pGEMT的连接和蓝白斑筛选表明杂交文库滴度和重组率分别达到1.5×10^6pfu/mL和96%,共收集阳性克隆8000个,形成了抑制消减杂交的质粒cDNA文库。随机挑取酶切质粒的电泳分析表明,载体中均有插入片段。高效抑制消减杂交文库的建立为进一
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