探讨miR-139-5p对鼻咽癌顺铂(DDP)耐药细胞DDP敏感性的影响及其相关作用机制。
方法培养鼻咽癌DDP耐药细胞株HNE1/DDP，分为miR-139-5p组、阴性对照组、DDP组和空白对照组，miR-139-5p组转染miR-139-5p类似物，阴性对照组转染阴性对照序列，DDP组和空白对照组不做转染处理。转染后miR-139-5p组、阴性对照组和DDP组均加入20 μmol/L DDP，空白对照组加入培养基，溴化吡啶(PI)单染后流式细胞术检测各组HNE1/DDP细胞凋亡率。采用Western blot检测HNE1/DDP细胞miR-139-5p组、阴性对照组和空白对照组磷酸肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化(p)-PI3K、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt及趋化因子受体4(CXCR4)蛋白的相对表达水平。采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-139-5p组、阴性对照组和空白对照组CXCR4 mRNA的表达水平。
结果空白对照组、DDP组、阴性对照组和miR-139-5p组HNE1/DDP细胞凋亡率分别是6.26%±1.19%、22.43%±3.88%、23.87%±3.21%和40.87%±4.04%, DDP组、阴性对照组和miR-139-5p组细胞凋亡率均高于空白对照组，miR-139-5p组细胞凋亡率高于DDP组和阴性对照组，差异均有统计学意义(P值均<0.05)。Western blot检测显示，miR-139-5p组p-Akt、p-PI3K、PI3K及CXCR4蛋白的相对表达量均低于空白对照组和阴性对照组，差异均有统计学意义(P值均<0.01)。实时荧光定量PCR检测结果显示，miR-139-5p组中HNE1/DDP细胞CXCR4的mRNA相对表达水平低于空白对照组和阴性对照组，差异均有统计学意义(P值均<0.01)。
结论转染miR-139-5p可提高鼻咽癌耐药细胞株HNE1/DDP对DDP的敏感性，其作用机制可能与抑制CXCR4的表达进而调控其下游PI3K/Akt信号通路的活化有关。