【摘 要】
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骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)是鸡(Gallus gallus)髓质骨的主要组成成分,在骨重建和矿化中发挥重要作用.为研究蛋鸡BSP基因表达调控机制及启动子区变异位点对基因表达的
【机 构】
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河北农业大学 动物科技学院,保定 071001保定市畜牧工作站,保定 071001;
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骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)是鸡(Gallus gallus)髓质骨的主要组成成分,在骨重建和矿化中发挥重要作用.为研究蛋鸡BSP基因表达调控机制及启动子区变异位点对基因表达的影响,本研究以海兰灰蛋鸡为受试动物,采用基因克隆和测序技术分析BSP基因启动子区序列变异;采用JASPAR2018在线软件进行转录因子结合位点预测,并构建不同长度启动子片段的荧光素酶报告基因重组载体,转染鸡成纤维细胞系DF-1后检测双荧光素酶活性;利用qRT-PCR技术测定BSP基因表达.结果表明,海兰灰蛋鸡BSP基因启动子(-1257～+142 bp)存在6种单倍型(Hap1～6),核心启动子区位于-202～+142 bp;启动子区单倍型Hap1和Hap5的转录活性存在差异;Hap1在核心启动子区域的高转录活性引起BSP基因表达水平的升高.本研究成功克隆并鉴定了鸡BSP基因的核心启动子,可为研究BSP基因表达调控机制和骨骼质量遗传选育提供基础资料.
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