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摘 要:目的对比不同饲养环境对Wistar大鼠血常规和血生化数据的影响。方法用兽用全自动血液细胞分析仪和全自动生化分析仪测不同饲养环境下大鼠的血常规与血液生化数据。结果普通开放环境饲养的大鼠与IVC屏障环境饲养的大鼠血常规六项数据中(HB、RBC、WBC、中性、淋巴、单核)WBC 差异及其显著(P <0.01),其余几项数据差异无显著性(P >0.05);生化九项数据中,TP、ALB、UREA、TC差异有显著性(P <0.05),ALT、AST、Crea、Glu、TG差异无显著性(P >0.05)。结论不同饲养环境对大鼠血常规与血生化数据有一定影响。
关键词:饲养环境;Wistar大鼠;血常规;血生化
实验动物结果受多种因素的不同影响,主要是遗传因素和环境因素的综合结果。其中环境可分为外环境和内环境。外环境是指实验动物设施以外的环境。内环境是指实验动物的生活环境。实验动物一生都生活在一个人工控制的环境下,失去了较为广泛的适应环境的能力。影响实验动物的环境因素主要有以下几点:物理因素、化学因素、生物因素和人为因素。本次试验旨在研究不同饲养环境对实验动物血常规和血生化数据的影响。
1 材料和方法
1.1 动物来源
成年(8~10周龄)wistar雄性大鼠20只。由济南朋悦实验动物繁育有限公司提供【SCXK(鲁)2014 0007】。
1.2 饲养环境
普通开放环境与屏障环境 【SYXK(鲁)2018 0007】。
1.3 主要试验仪器及试剂
1.3.1 主要试验仪器
BC-2800Vet 兽用全自动血液细胞分析仪,BS-190全自动生化分析仪,台式低速自动平衡离心机
1.3.2 主要试剂
试剂:均购自深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司。
血常规:兽用血液细胞分析仪用溶血剂,Lot:2015101501;兽用清洗液,Lot:2015102401;兽用血液细胞分析仪用稀释液,Lot:2015091201。
血生化:谷丙转氨酶ALT,Lot:140116004,IFCC法;谷草转氨酶 AST,140215026,IFCC法;总蛋白TP,Lot:140815023,双缩脲法;白蛋白ALB,Lot:140916001,溴甲酚绿法;尿素氮UREA,Lot:141316003,紫外-谷氨酸脱氢酶法;肌酐CREA,Lot:141016003,改良Jaff法;葡萄糖Glu,Lot:141516003,葡萄糖氧化酶法;总胆固醇TC,Lot:141616003,氧化酶法;甘油三酯TG,Lot:141716002,氧化酶法。
1.4 试验方法
1.4.1 将大鼠随机分为两组,每组10只,单笼单只饲养。第一组在屏障环境内饲养,水、饲料、垫料、笼具高压灭菌处理,每3d更换一次垫料;第二组在普通开放式环境下饲养,水、饲料、垫料、笼具不经过高压灭菌处理直接使用,每5d更换一次垫料。
1.4.2 饲养四周以后,将大鼠禁食16小时(不禁水)
1.4.3 标记并称重大鼠。根据体重腹腔注射1%戊巴比妥钠麻醉,腹主动脉取血,EDTA-Na2抗凝测血常规。另取一管血液,40分钟后,3000转离心10分钟,吸取上层血清,备做血生化检测。
1.5 统计方法
双因素方差分析法
2 结果
2.1 血常规
HB P值 0.570;RBC P值 0.903;WBC P值 0.000;
中性粒细胞P值0.581;淋巴细胞P值0.169;单核粒细胞P值0.957
2.2血生化
ALT P值0.545;AST P值0.975;TP P值0.002;ALB P值0.002;UREA P值0.020;
Crea P值0.904;Glu P值0.858;TC P值0.018;TG P值0.676
3讨论
3.1 实验动物被称为生命科学领域中的活试剂,即是生命科学的研究对象,又是科学研究的载体,其各项生理数据、生化指标的准确性对生命科学研究具有重要意义。
3.2 本实验对不同饲养环境下Wistar大鼠的血常规、血液生化值进行了对比,结果显示普通开放环境饲养的大鼠与屏障环境饲养的大鼠血常规六项数据中(HB、RBC、WBC、中性、淋巴、单核)WBC 差异及其显著(P <0.01),其余几项数据差异无显著性(P >0.05);生化九项数据中,TP、ALB、UREA、TC差异有显著性(P <0.05),ALT、AST、Crea、Glu、TG差異无显著性(P >0.05)。
3.3实验进行到第三周开始,普通饲养环境下的各只大鼠,颈部、头部陆续出现抓伤,被毛脱落,皮肤裸露,严重的有出血等现象。加之血常规中白细胞均值高于洁净环境白细胞均值,差异极其显著(P <0.01),怀疑是由于普通环境内细菌等微生物数量过高引起。因此在实验中应严格按照要求在符合实验的环境中饲养实验动物,以排除非实验因素的影响,使实验结果更加客观准确。
关键词:饲养环境;Wistar大鼠;血常规;血生化
实验动物结果受多种因素的不同影响,主要是遗传因素和环境因素的综合结果。其中环境可分为外环境和内环境。外环境是指实验动物设施以外的环境。内环境是指实验动物的生活环境。实验动物一生都生活在一个人工控制的环境下,失去了较为广泛的适应环境的能力。影响实验动物的环境因素主要有以下几点:物理因素、化学因素、生物因素和人为因素。本次试验旨在研究不同饲养环境对实验动物血常规和血生化数据的影响。
1 材料和方法
1.1 动物来源
成年(8~10周龄)wistar雄性大鼠20只。由济南朋悦实验动物繁育有限公司提供【SCXK(鲁)2014 0007】。
1.2 饲养环境
普通开放环境与屏障环境 【SYXK(鲁)2018 0007】。
1.3 主要试验仪器及试剂
1.3.1 主要试验仪器
BC-2800Vet 兽用全自动血液细胞分析仪,BS-190全自动生化分析仪,台式低速自动平衡离心机
1.3.2 主要试剂
试剂:均购自深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司。
血常规:兽用血液细胞分析仪用溶血剂,Lot:2015101501;兽用清洗液,Lot:2015102401;兽用血液细胞分析仪用稀释液,Lot:2015091201。
血生化:谷丙转氨酶ALT,Lot:140116004,IFCC法;谷草转氨酶 AST,140215026,IFCC法;总蛋白TP,Lot:140815023,双缩脲法;白蛋白ALB,Lot:140916001,溴甲酚绿法;尿素氮UREA,Lot:141316003,紫外-谷氨酸脱氢酶法;肌酐CREA,Lot:141016003,改良Jaff法;葡萄糖Glu,Lot:141516003,葡萄糖氧化酶法;总胆固醇TC,Lot:141616003,氧化酶法;甘油三酯TG,Lot:141716002,氧化酶法。
1.4 试验方法
1.4.1 将大鼠随机分为两组,每组10只,单笼单只饲养。第一组在屏障环境内饲养,水、饲料、垫料、笼具高压灭菌处理,每3d更换一次垫料;第二组在普通开放式环境下饲养,水、饲料、垫料、笼具不经过高压灭菌处理直接使用,每5d更换一次垫料。
1.4.2 饲养四周以后,将大鼠禁食16小时(不禁水)
1.4.3 标记并称重大鼠。根据体重腹腔注射1%戊巴比妥钠麻醉,腹主动脉取血,EDTA-Na2抗凝测血常规。另取一管血液,40分钟后,3000转离心10分钟,吸取上层血清,备做血生化检测。
1.5 统计方法
双因素方差分析法
2 结果
2.1 血常规
HB P值 0.570;RBC P值 0.903;WBC P值 0.000;
中性粒细胞P值0.581;淋巴细胞P值0.169;单核粒细胞P值0.957
2.2血生化
ALT P值0.545;AST P值0.975;TP P值0.002;ALB P值0.002;UREA P值0.020;
Crea P值0.904;Glu P值0.858;TC P值0.018;TG P值0.676
3讨论
3.1 实验动物被称为生命科学领域中的活试剂,即是生命科学的研究对象,又是科学研究的载体,其各项生理数据、生化指标的准确性对生命科学研究具有重要意义。
3.2 本实验对不同饲养环境下Wistar大鼠的血常规、血液生化值进行了对比,结果显示普通开放环境饲养的大鼠与屏障环境饲养的大鼠血常规六项数据中(HB、RBC、WBC、中性、淋巴、单核)WBC 差异及其显著(P <0.01),其余几项数据差异无显著性(P >0.05);生化九项数据中,TP、ALB、UREA、TC差异有显著性(P <0.05),ALT、AST、Crea、Glu、TG差異无显著性(P >0.05)。
3.3实验进行到第三周开始,普通饲养环境下的各只大鼠,颈部、头部陆续出现抓伤,被毛脱落,皮肤裸露,严重的有出血等现象。加之血常规中白细胞均值高于洁净环境白细胞均值,差异极其显著(P <0.01),怀疑是由于普通环境内细菌等微生物数量过高引起。因此在实验中应严格按照要求在符合实验的环境中饲养实验动物,以排除非实验因素的影响,使实验结果更加客观准确。