【摘 要】
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目的 探究Sch9对酵母寿命的调控作用与泛素化水平之间的相关性.方法 通过荧光染色的方法检测酵母细胞的活性氧(ROS)水平,采用超氧化物诱导剂及雷帕霉素靶蛋白复合物1(TORC1)抑制剂处理细胞,并利用蛋白质印迹技术检测细胞泛素化蛋白的表达水平.结果 荧光染色显示,对数期sch9Δ突变体具有较高的超氧阴离子(P<0.01).进一步用超氧诱导剂甲萘醌处理细胞,随着甲萘醌浓度增加,细胞泛素化水平具有降低趋势,且甲萘醌浓度与超氧阴离子含量呈正相关(P<0.01),与H2 O2水平呈负相关(P<0.01).此外,
【机 构】
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成都医学院 基础医学院 成都 610500;成都医学院 基础医学院 成都 610500;成都体育学院 运动医学与健康学院 成都 610041;成都市石室天府中学 生物教研组 成都 610041;成都市
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目的 探究Sch9对酵母寿命的调控作用与泛素化水平之间的相关性.方法 通过荧光染色的方法检测酵母细胞的活性氧(ROS)水平,采用超氧化物诱导剂及雷帕霉素靶蛋白复合物1(TORC1)抑制剂处理细胞,并利用蛋白质印迹技术检测细胞泛素化蛋白的表达水平.结果 荧光染色显示,对数期sch9Δ突变体具有较高的超氧阴离子(P<0.01).进一步用超氧诱导剂甲萘醌处理细胞,随着甲萘醌浓度增加,细胞泛素化水平具有降低趋势,且甲萘醌浓度与超氧阴离子含量呈正相关(P<0.01),与H2 O2水平呈负相关(P<0.01).此外,利用雷帕霉素处理细胞,可降低野生型酵母和sch9Δ突变体的泛素化水平(P<0.05).结论 细胞的泛素化与超氧阴离子含量无关,但超氧阴离子可能作为一种适应性的信号激活胁迫应答基因表达.抑制TORC1活性降低泛素化的调控机制,可能与不依赖于Sch9的信号通路有关,为酵母细胞蛋白质量控制和寿命调控提供新的分子理论基础.
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