论文部分内容阅读
目的
研究Survivin基因在牛蒡子苷元促进肺癌细胞化疗敏感性中的作用。
方法应用RT-PCR技术从H460细胞中扩增全长人Survivin cDNA,并将其克隆至pcDNA3.1(+)表达载体,构建人Survivin基因真核表达质粒。将pcDNA3.1-Survivin重组质粒或空载体分别转染H460细胞,孵育24 h后,应用Western blot法检测Survivin过表达情况;转染细胞与牛蒡子苷元单独或联合顺铂处理,应用Annexin-Ⅴ/PI染色法检测细胞凋亡情况。
结果与未转染和转染空载体质粒的H460细胞相比,转染pcDNA3.1-Survivin重组质粒H460细胞Survivin水平显著增加,提高大约10倍。低剂量顺铂对H460细胞Survivin蛋白表达影响不显著,而牛蒡子苷元可显著抑制Survivin蛋白表达水平。当牛蒡子苷元与顺铂联合作用时,Survivin蛋白表达抑制程度更大。与转染空载体质粒相比,转染Survivin表达重组质粒的细胞对牛蒡子苷元单独或联合顺铂诱导的凋亡具有抗性,细胞凋亡比率显著下降。
结论牛蒡子苷元抑制人肺癌细胞中Survivin基因表达。牛蒡子苷元促人肺癌细胞顺铂敏感性与抑制Survivin通路有关。