【摘 要】
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目的 探讨对人退变腰椎间盘细胞以外源性生长因子TGF-β1进行基因修饰的可能性,同时检测相应编码蛋白的表达情况.方法 髓核细胞取自8例因腰椎间盘退变手术病人,在体外进行
【机 构】
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第二军医大学附属长征医院骨科,上海,200003
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目的 探讨对人退变腰椎间盘细胞以外源性生长因子TGF-β1进行基因修饰的可能性,同时检测相应编码蛋白的表达情况.方法 髓核细胞取自8例因腰椎间盘退变手术病人,在体外进行原代培养,并分作3组.将构建好的分别携带增荧光绿色蛋白EGFP基因(报告基因)和TGF-β1基因的腺病毒载体Ad/CMV-EGFP、Ad/CMV- TGF-β1直接转染细胞,对转染情况进行观察.结果 第一组(Ad/CMV-EGFP转染组)经荧光显微镜下观察有特异性绿色荧光表达,并持续4周,表示外源基因转入成功;第二组(Ad/CMV-TGF-β1转染组)经组化染色证明产生TGF-β1,转染率约30%,而作为对照的第三组则染色基本阴性.结论 采用腺病毒载体可以将TGF-β1基因转染修饰腰椎退变椎间盘细胞,并能表达相应的生长因子TGF-β1,为今后腰椎间盘退变疾病的基因治疗提供了实验基础.
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