【摘 要】
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目的 研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)通过对乙酰化微管蛋白α(Ac-Tub α)的调控,抑制矽肺肌成纤维细胞转化的作用及机制.方法 构建矽肺大鼠模型,分
【机 构】
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华北理工大学医学实验研究中心/老年医学国际科技合作基地,唐山,063000华北理工大学中医学院,唐山,063000;华北理工大学基础医学院,唐山,063000;
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目的 研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)通过对乙酰化微管蛋白α(Ac-Tub α)的调控,抑制矽肺肌成纤维细胞转化的作用及机制.方法 构建矽肺大鼠模型,分为对照组(4、8周)、矽肺模型组(4、8周)、Ac-SDKP抗纤维化治疗组和预防治疗组;原代肺成纤维细胞分为对照组、血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导组、Ac-SDKP预处理组、血管紧张素Ⅱ受体1(AT1)阻滞剂(缬沙坦)预处理组、组蛋白去乙酰化酶(HDAC)6选择性抑制剂(TCS HDAC6 20b)预处理组.免疫组化及免疫荧光染色法观察Ac-Tub α、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在肺组织或细胞中的表达与定位.免疫印迹法检测肺组织或细胞中Ⅰ型胶原、α-SMA、Ac-Tubα、HDAC6蛋白的表达.结果 免疫组化结果显示,矽肺模型组矽结节和间质纤维化区域Ac-Tubα表达缺如,α-SMA阳性表达.Ac-SDKP能够抑制Ⅰ型胶原、α-SMA、HDAC6蛋白的表达,其中抗纤维化治疗组与矽肺模型8周组比较下降至48.39%、52.63%和70.18%,预防治疗组与矽肺模型8周组比较下降至32.26%、64.91%和54.39%;在Ac-SDKP抗纤维化治疗组和预防治疗组Ac-Tub α蛋白表达为矽肺模型8周组的3.00和2.90倍,以上结果经方差分析差异均有统计学意义(P<0.05).Ang Ⅱ诱导组Ac-Tubα表达减弱为对照组的44.44%.而AngⅡ诱导组的α-SMA、HDAC6和Ⅰ型胶原表达增多,分别是对照组的1.66、3.56和4.00倍(P<0.05).予以Ac-SDKP、缬沙坦或TCSHDAC6 20b预处理,能明显抑制该变化.结论 Ac-SDKP抑制矽肺大鼠肌成纤维细胞转化和胶原沉积,发挥抗矽肺纤维化的作用,可能与下调HDAC6和促进Ac-Tub α的表达有关.
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