【摘 要】
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目的 制备巨噬细胞外泌体-脂质体杂化纳米粒(MEL NPs),并对其理化性质进行研究.方法 超声法制备MEL NPs,通过马尔文粒度分析仪、透射电镜、荧光分光光度计、以及Western blot对制备的MEL NPs进行表征,倒置荧光显微镜和流式细胞仪观察Hepa 1-6细胞对MEL NPs的摄取.结果 MEL NPs的平均粒径为(98.20±0.45)nm,PDI=(0.17±0.02),Zeta电位为(-16.23±1.00)mV,具有明显的囊泡结构.融合后的MEL NPs中DiI荧光强度恢复,DiD
【机 构】
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安徽中医药大学药学院,合肥 230012;中药复方安徽省重点实验室,合肥 230012;药物制剂技术与应用安徽省重点实验室,合肥 230012;蚌埠医学院第一附属医院,安徽 蚌埠 233000;蚌埠医
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目的 制备巨噬细胞外泌体-脂质体杂化纳米粒(MEL NPs),并对其理化性质进行研究.方法 超声法制备MEL NPs,通过马尔文粒度分析仪、透射电镜、荧光分光光度计、以及Western blot对制备的MEL NPs进行表征,倒置荧光显微镜和流式细胞仪观察Hepa 1-6细胞对MEL NPs的摄取.结果 MEL NPs的平均粒径为(98.20±0.45)nm,PDI=(0.17±0.02),Zeta电位为(-16.23±1.00)mV,具有明显的囊泡结构.融合后的MEL NPs中DiI荧光强度恢复,DiD荧光强度降低;外泌体的标志蛋白Alix和TSG101在MEL NPs中均有表达;脂质体与外泌体融合后促进了细胞摄取.结论 本方法成功制备了MEL NPs,制备方法简单可靠,且具有良好的细胞摄取率,为后续进一步研究奠定基础.
其他文献
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胰腺癌是一种恶性程度极高的消化系统肿瘤.因缺乏敏感有效的检测标志物,多数患者就诊时已处于晚期,治疗手段有限,预后极差,因此早期诊断是患者能及时治疗、改善预后的最有效途径.外泌体是由细胞分泌的细胞外囊泡,具有脂质双分子膜结构保证内含的大量生物活性物质稳定存在,可确切反映亲代细胞特征,并且广泛存在于各种体液中,可无创、方便、实时提取,具有成为肿瘤早期诊断标志物的潜力.既往研究表明,与传统的诊断方法相比,外泌体在各类癌症的早期诊断中表现出更高的敏感度和特异性.本文就外泌体在胰腺癌早期诊断中的研究进展作一综述.
局部进展期直肠癌(LARC)的治疗极具挑战性,仅凭手术切除难以达到满意疗效,近年来LARC诊治倾向于多学科协作(MDT)模式,依托其出现的新辅助治疗策略是LARC诊治的里程碑式进展.目前,LARC首选疗法为新辅助放化疗联合全直肠系膜切除术.本文围绕LARC新辅助治疗主要方案作一综述,以期为临床诊疗提供参考.
目的 建立超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱组合式高分辨质谱(UHPLC Q-Exactive Orbitrap MS/MS)技术和分子网络联合分析五味子联苯环辛二烯型木脂素类化学成分.方法 采用UHPLC CORTECS C18+色谱柱(4.6 mm×150 mm,2.7μm),以乙腈-0.1％甲酸水为流动相进行梯度洗脱.分别在正、负离子模式下,采集Q-Exactive Orbitrap MS/MS数据,根据MS/MS碎片模式的相似性创建GNPS分子网络,运用Cytoscape 3.6.1软件筛选结构
目的 将膜分离技术与传统工艺大孔树脂吸附联合对山茱萸皂苷进行分离纯化.方法 采用不同孔径的微滤、超滤膜对山茱萸皂苷进行精制;对不同种类的大孔树脂进行优化;以HPD-300型大孔树脂对不同处理方式药液的饱和吸附量、吸附率、解吸率评价大孔树脂污染程度.结果 最佳分离纯化工艺为0.22μm微滤膜,50 kDa的超滤膜对山茱萸皂苷分离纯化,HPD-300型大孔树脂对山茱萸皂苷进一步纯化.使用微滤超滤预处理药液后,HPD-300型大孔树脂饱和吸附量提高40％.结论 适宜的微滤膜、超滤膜与大孔树脂吸附联用可以达到分离
目的 研究落葵薯内生真菌禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)TSQ-2的化学成分.方法 利用大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20、Prep-HPLC等色谱方法对禾谷镰刀菌固体发酵物乙酸乙酯部位化学成分进行分离纯化,根据理化性质及现代波谱技术对单体化合物进行结构鉴定.初步评价化合物1～5对两种人类肿瘤细胞(SMMC-7721、HepG2)的体外细胞增殖抑制活性和对两种致病菌(MRSA、E.coil)的抗菌活性.结果 从禾谷镰刀菌固体发酵物乙酸乙酯部位分离得到5个化合物,分别鉴定为z
目的 建立基于质量分数权重系数法的血塞通滴丸整合溶出度检验方法.方法 参照《中国药典》2020年版四部溶出度测定法第三法(小杯法);采用高效液相色谱法测定不同时间点血塞通滴丸中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd 5种指标成分的溶出度,以质量分数加权后计算整合溶出度;对整合溶出度进行相似分析及模型拟合,计算溶出参数T50,Td,T85.结果 采用试验确定的溶出条件,15 min时血塞通滴丸整合溶出度均大于85％.整合溶出度与5种指标成分溶出曲线均相似(f2>50).溶出
目的 利用超高效液相色谱-线性离子阱-串联静电场轨道阱质谱(UHPLC-LTQ-Orbitrap MSn)对苦碟子药材醇提物不同洗脱部位的化学成分进行分析鉴定.方法 采用Acquity UHPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以乙腈(A)-0.1％甲酸-水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,在负离子模式下,分别对苦碟子药材醇提物经大孔吸附树脂分离的30％、50％、70％和95％乙醇洗脱部位进行数据采集.根据高分辨质谱提供的准分子离子峰和多级质谱碎片,获取目标化合物的精确分子
目的 优化石榴皮中安石榴苷的纯化工艺,并对安石榴苷精制物的稳定性进行研究.方法 采用大孔吸附树脂与膜分离技术联合的方法,以安石榴苷的含量为指标,优化工艺的洗脱及浓缩条件参数,确定最优工艺.将制备得到的精制物置于高温(60℃)、高湿(75％RH)、强光照射(4500 lx)条件下,于0、5、10 d取样测定,考察其稳定性.结果 纯化工艺中上样液经静态吸附后,洗脱条件为:使用6 BV 8％乙醇进行除杂(流速4 BV·h-1),再用含0.01％NaOH的纯化水洗脱至黄色条带到达柱底后,接收3 BV流分,流分经2
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