【摘 要】
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为了避免四酶焦测序体系中由于三磷酸腺苷双磷酸酶（apyrase）造成的测序结果偏差,文章建立了一种定量性能好的无三磷酸腺苷双磷酸酶的三酶焦测序体系。方法是将生物素修饰的DNA
【机 构】
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南京医科大学基础医学院,华东医学生物技术研究所
【基金项目】
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国家人事部留学人员科技活动项目择优资助项目（编号：人社厅发[2008]86号）资助
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为了避免四酶焦测序体系中由于三磷酸腺苷双磷酸酶（apyrase）造成的测序结果偏差,文章建立了一种定量性能好的无三磷酸腺苷双磷酸酶的三酶焦测序体系。方法是将生物素修饰的DNA模板、荧光素酶和ATP硫酸化酶固定在磁性微球表面进行焦测序反应,当加入一种dNTP进行焦测序反应完后,采用磁性分离技术,除去焦测序反应产生的ATP和剩余的dNTP,然后加入另一种dNTP进行测序,按同样的方法去除影响下一轮测序反应的成分,实现循环测序。此体系能准确判读待测DNA的碱基序列,且可定量测定单核苷酸序列多态性（SNP）中两种
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