探讨钙敏感受体(CaSR)在缺氧诱导的气道黏液高分泌中的作用。

通过缺氧培养箱(94%N₂、1%O₂、5%CO₂、37 ℃)培养人气道上皮细胞HBE16的方法复制细胞缺氧模型。转染CaSR的小干扰RNA(siRNA)及预先给予CaSR特异性激动剂CaCl₂、磷脂酶C信号通路不同的抑制剂：Gα_q/11蛋白特异性抑制剂(YM–254890)，磷脂酶C特异性抑制剂(U73122)，三磷酸肌醇受体(IP₃R)特异性抑制剂(2–APB)及细胞内Ca^2＋螯合剂(BAPTA–AM)后，各组细胞再施以缺氧处理。采用反转录–PCR检测黏蛋白(MUC)5AC mRNA的转录水平，Western印迹法检测CaSR蛋白的表达水平，酶联免疫吸附(ELISA)法检测MUC5AC蛋白的相对含量，共聚焦显微镜观察细胞内Ca^2＋浓度的变化。

缺氧组CaSR蛋白相对表达水平(0.423±0.028)显著高于对照组(0.185±0.036)(t＝12.75，P<0.001)；细胞内Ca^2＋浓度、MUC5AC蛋白相对含量及MUC5AC mRNA相对表达水平[(154.2±11.4)nmol/L、(0.624 ±0.063)μg/L、0.736±0.045]也显著高于对照组[(67.5±2.8)nmol/L、(0.257±0.051)μg/L、0.321±0.034](t＝18.04、11.06、18.05，均P<0.001)。CaCl₂能上调缺氧引起的上述作用，转染CaSR siRNA能够下调缺氧引起的上述效应(均P<0.001)。预先给予YM–254890、U73122、2–APB、BAPTA–AM处理细胞，细胞内Ca^2＋浓度、MUC5AC蛋白相对含量及MUC5AC mRNA相对表达水平均显著低于单纯缺氧组(均P<0.05)。

CaSR可通过Gα_q/11/磷脂酶C/三磷酸肌醇/细胞内Ca^2＋信号通路参与缺氧诱导的气道黏液高分泌。