獐ISSR-PCR反应体系的建立与优化及引物筛选

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【摘要】

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利用正交试验L16（4^5）对影响獐（Hydropotes inermis）ISSR-PCR反应的TaqDNA聚合酶浓度、dNTP浓度、引物浓度、Mg^2＋浓度及模板DNA浓度5个因素在4个水平上进行优化，同时对退火温度进

【作者】

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张龙龙鲍毅新于华会许婧孙波

【机构】

：

浙江师范大学生态研究所,中国林业科学研究院亚热带林业研究所

【出处】

：

生态科学

【发表日期】

：

2009年4期

【关键词】

：

獐正交试验 ISSR 引物筛选 Chinese water deer （H. inermis） orthogonal tests ISSR primer

【基金项目】

：

基金项目：浙江省重点学科（生态学）基金和浙江省新苗人才计划基金（2007R40G2030152）

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利用正交试验L16（4^5）对影响獐（Hydropotes inermis）ISSR-PCR反应的TaqDNA聚合酶浓度、dNTP浓度、引物浓度、Mg^2＋浓度及模板DNA浓度5个因素在4个水平上进行优化，同时对退火温度进行梯度PCR反应，以建立适合于獐ISSR-PCR反应的最佳体系。最终确定獐25gLISSR-PCR反应体系为：Taq酶1．25U·25μL^-1、Mg^2＋浓度2．5mmol·L^-1、引物浓度0．3μmol·L^-1、DNA模板量350ng·25

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