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根据GenBank中牛分枝杆菌的基因序列，设计合成一对扩增CFP-10基因完整ORF的特异性引物，以pET32a（＋）为载体构建重组表达载体CFP-10／pET32a（＋）。重组表达载体转化大肠杆菌BL21（DE3），经0．9mmol／LIPTG37。C诱导3h后表达，收集菌体并裂解，裂解后上清和沉淀经SDS—PAGE分析，结果表明融合蛋白分子量分别为30kD，表达产物以可溶性存在于上清中，后经Ni．NTA吸附柱方法对目的蛋白进行纯化，经薄层凝胶扫描分析，纯化后的His融合蛋白纯度达95％，该CFP-10