【摘 要】
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目的：探讨NADPH氧化酶4（NADPH oxidase 4,NOX4）在体外大鼠心肌细胞肥大中的作用及其信号机制。方法：分离SD乳大鼠原代心肌细胞，通过内皮素1（endothelin-1,ET-1;0.1μmol/L）诱导建立体外大鼠心肌细胞肥大模型，采用NOX4抑制剂GKT137831抑制肥大心肌细胞中NOX4表达。实验分为空白对照组、GKT137831组、ET-1组和GKT137831+ET
【基金项目】
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河南省自然科学基金资助项目（No.202300410150）；
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目的：探讨NADPH氧化酶4（NADPH oxidase 4,NOX4）在体外大鼠心肌细胞肥大中的作用及其信号机制。方法：分离SD乳大鼠原代心肌细胞，通过内皮素1（endothelin-1,ET-1;0.1μmol/L）诱导建立体外大鼠心肌细胞肥大模型，采用NOX4抑制剂GKT137831抑制肥大心肌细胞中NOX4表达。实验分为空白对照组、GKT137831组、ET-1组和GKT137831+ET-1组。采用RT-qPCR检测心肌细胞肥大标志物心房钠尿因子（atrial natriuretic factor,ANF）和β-肌球蛋白重链（β-myosin heavy chain,β-MHC）的mRNA表达水平。采用二氢乙啶（dihydroethidium,DHE）染色检测心肌细胞活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平。采用Western blot法检测NOX催化亚基NOX4和调节亚基p47phox的蛋白表达，以及蛋白激酶B（protein kinase B,PKB/Akt）、糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β）和组蛋白脱乙酰酶4（histone deacetylase 4,HDAC4）的磷酸化水平。结果：ET-1可以诱导体外大鼠心肌细胞肥大，GKT137831显著抑制了ET-1诱导的心肌肥大，降低了心肌细胞表面积及肥大标志物ANF和β-MHC的mRNA表达水平（P＜0.01）。GKT137831抑制了NOX中催化亚基NOX4和调节亚基p47phox的蛋白表达（P＜0.05或P＜0.01），降低了ET-1诱导的心肌细胞中ROS的生成（P＜0.05或P＜0.01）。GKT137831抑制了ET-1诱导的心肌细胞中Akt、GSK-3β和HDAC4蛋白的磷酸化（P＜0.05或P＜0.01）。结论：抑制NOX4减轻了ET-1诱导的体外大鼠心肌细胞肥大，该作用可能与其抑制肥大信号通路Akt/GSK-3β的激活，进而抑制转录因子HDAC4蛋白的磷酸化有关。
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