探讨马钱子碱对人胰腺癌CFPAC-1细胞凋亡的影响及其可能机制。
方法以不同浓度马钱子碱干预CFPAC-1细胞。采用MTT比色法和流式细胞仪检测细胞增殖和凋亡;采用花青染料(JC-1)染色法检测细胞线粒体膜电位的变化;采用蛋白质印迹法检测Bax、Bcl-2蛋白表达情况。
结果0(对照组)及0.4、0.8 mmol/L马钱子碱组干预CFPAC-1细胞24、48、72 h后,细胞增殖抑制率分别为0;(30.23±0.55)%、(40.61±0.15)%、(46.98±1.27)%;(50.17±0.75)%、(61.23±0.91)%、(70.32±0.40)%,呈浓度及时间依赖性增加而升高,显著高于对照组,且不同时间两两组间比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。0及0.4、0.8 mmol/L马钱子碱干预CFPAC-1细胞48 h后,细胞凋亡率分别为(2.92±0.46)%、(4.64±1.31)%、(13.09±0.65)%,随药物浓度增加而逐渐升高,其中0.8 mmol/L干预组显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);随着药物浓度的增加,呈红色荧光的未凋亡活细胞逐渐减少,而呈绿色荧光的凋亡坏死细胞逐渐增多,提示CFPAC-1细胞线粒体膜电位受到重度破坏而降低;CFPAC-1细胞的Bcl-2蛋白表达量分别为(0.92±0.12)、(0.67±0.14)、(0.35±0.14)mmol/L,Bax蛋白表达量分别为(0.56±0.12)、(0.85±0.10)、(1.15±0.12)mmol/L,随马钱子碱浓度增加,Bcl-2表达量显著下调,而Bax表达量显著上调,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。
结论马钱子碱可能通过线粒体凋亡途径上调Bax和下调Bcl-2表达,从而诱导人胰腺癌CFPAC-1细胞凋亡。