【摘 要】
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根据GenBank中副猪嗜血杆菌（HPS）的P2蛋白基因序列,设计合成1对特异性引物,用P2-PCR方法从HB070214株中克隆了1 077bp的P2蛋白基因。将P2蛋白基因亚克隆到原核表达载体pET-32a
【机 构】
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南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,长江大学动物科学学院
【基金项目】
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教育部博士点基金资助项目（20030307012）,教育部优秀青年教师重点资助项目（104101）
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根据GenBank中副猪嗜血杆菌（HPS）的P2蛋白基因序列,设计合成1对特异性引物,用P2-PCR方法从HB070214株中克隆了1 077bp的P2蛋白基因。将P2蛋白基因亚克隆到原核表达载体pET-32a中构建了重组表达质粒pET-P2,在IPTG的诱导下成功表达了相对分子质量约为60 500的可溶性融合蛋白P2-His;经SDS-PAGE和凝胶薄层扫描分析,融合蛋白的表达量约占细菌总蛋白量的30%。将融合蛋白加入镍琼脂糖凝胶树脂层析柱,经300mmol/L咪唑磷酸盐缓冲液洗脱,其纯度可达92.5%
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