【摘 要】
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目的 制备高特异性的小鼠抗人IgE单克隆抗体(mAb)作为候选免疫吸附剂.方法 用重组人IgE重链2-4区(IgECε2-4)免疫BALB/c小鼠,经细胞融合后,用甲基纤维素半固体培养基法筛选杂
【机 构】
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南方医科大学检验与生物技术学院,广东广州510000广州康盛生物科技有限公司,广东广州510000;
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目的 制备高特异性的小鼠抗人IgE单克隆抗体(mAb)作为候选免疫吸附剂.方法 用重组人IgE重链2-4区(IgECε2-4)免疫BALB/c小鼠,经细胞融合后,用甲基纤维素半固体培养基法筛选杂交瘤细胞.用IgECε2-4包被酶标板,间接ELISA筛选阳性细胞株,用天然IgE、IgG、IgM、IgA、IgD包被酶标板,间接ELISA检测阳性杂交瘤细胞无血清培养上清与天然IgE的亲和性和特异性;将稳定分泌特异性抗IgE mAb的细胞株扩大培养,小鼠体内诱生腹水法制备mAb,检测腹水的效价和亲和力,利用mAb亚型鉴定试剂盒检测获得的mAb的亚型.结果 经过5次细胞融合总共得到29株阳性杂交瘤细胞,有11株与天然IgE亲和性较强,有2株与其他免疫球蛋白几乎无交叉反应,分别为3E9和7B4.结论 成功制备了小鼠抗人IgE mAb,该mAb具有高效价、较高亲和力和高特异性.
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