【摘 要】
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目的 研究甘草素通过微RNA-486-3p（microRNA-486-3p, miR-486-3p）靶向盘蛋白结构域受体-1（discoidin domain receptor 1, DDR1）抑制口腔鳞状细胞癌及其作用机制。方法 采用不同浓度甘草素处理人口腔鳞状细胞癌SCC-15细胞48 h,MTT法检测甘草素对细胞生存率的影响。将细胞分为对照组、甘草素组、miR抑制剂组、病毒对照组、抑制慢病毒
【基金项目】
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国家自然科学基金地区科学基金项目（81760196）；
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目的 研究甘草素通过微RNA-486-3p（microRNA-486-3p, miR-486-3p）靶向盘蛋白结构域受体-1（discoidin domain receptor 1, DDR1）抑制口腔鳞状细胞癌及其作用机制。方法 采用不同浓度甘草素处理人口腔鳞状细胞癌SCC-15细胞48 h,MTT法检测甘草素对细胞生存率的影响。将细胞分为对照组、甘草素组、miR抑制剂组、病毒对照组、抑制慢病毒组和过表达慢病毒组，RTPCR检测mi R-486-3p和DDR1表达；5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷（5-ethynyl-2′-deoxyuridine, EdU）染色检测细胞增殖情况；Western blot检测cleaved Caspase-3和Caspase-3表达。将细胞分为转染对照组和转染组，使用包含野生型或突变型DDR1 3’-UTR的双荧光素酶报告基因检测系统检测miR-486-3p和DDR1的结合情况。结果 与0μmol/L甘草素比较，100、120、150μmol/L甘草素能明显抑制SCC-15细胞的生存率（P＜0.05）。与对照组比较，甘草素组miR-486-3p的相对表达量、cleaved Caspase-3/Caspase-3相对比率均明显升高（P＜0.05）,DDR1的相对表达量、EdU阳性细胞相对比值均明显降低（P＜0.05）。与甘草素组比较，mi R抑制剂组miR-486-3p的相对表达量、cleaved Caspase-3/Caspase-3相对比率均明显降低（P＜0.05）,DDR1的相对表达量、EdU阳性细胞相对比值均明显升高（P＜0.05）。与病毒对照组比较，抑制慢病毒组EdU阳性细胞相对比率明显降低（P＜0.05）,cleaved Caspase-3/Caspase-3相对比率明显升高（P＜0.05）；过表达慢病毒组EdU阳性细胞相对比率明显升高（P＜0.05）,cleaved Caspase-3/Caspase-3相对比率明显降低（P＜0.05）。miR-486-3p与DDR1存在结合位点。与转染对照组比较，转染组相对荧光素酶活力明显降低（P＜0.05），野生型DDR1 3’-UTR相对荧光素酶活力明显降低（P＜0.05）。结论 甘草素通过miR-486-3p靶向DDR1抑制SCC-15细胞增殖，促进细胞凋亡，进而发挥抗肿瘤作用。
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