论文部分内容阅读
目的克隆人热休克蛋白70（HSP70）基因，构建其原核高效表达载体。方法将PCR扩增的HSP70基因克隆到原核高效表达载体pET-28b中，转化大肠杆菌JM109。挑选阳性克隆，提取质粒pE28b70F，转化大肠杆菌BL21（DE3）。IPTG诱导表达目标蛋白。结果在大肠杆菌中成功表达了HSP70，表达量约占细菌总蛋白的22．3％，其中可溶性目标蛋白占上清总蛋白的12％。Western blot表明该目标蛋白具有与鼠抗人HSP70单抗特异结合的抗原活性。通过Ni^2＋-NTA亲和柱，从1L诱导产物中纯化出