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目的:构建RNA干扰慢病毒载体,研究慢病毒携带的短发夹干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)对内皮细胞中组织因子(tissue factor,TF)表达的抑制作用。方法:将靶向人TF基因的2条shRNA表达序列克隆到慢病毒载体pENTRTM/U6的黏性末端,测序鉴定后,与目标载体pLenti6/BLOCK-iTTM-DEST vector进行位点特异性重组,再测序;经脂质体导入293FT细胞,包装成慢病毒,收集病毒上清并测定病毒滴度。RT-PCR和ELISA检测干扰后内皮细胞TF的表