探讨α-1抗胰蛋白酶(A1AT)减轻胰腺外分泌细胞对移植胰岛的损伤及促进胰岛β细胞增殖。
方法(1)体外实验：选10只BALB/c小鼠，挑取所有的胰岛并收集胰腺外分泌细胞。纯化胰岛组(n＝6)，每孔100个胰岛，常规培养；实验组(n＝6)，每孔100个胰岛和等体积外分泌细胞同时培养，并加入A1AT(0.5 mg/ml)；对照组(n＝6)，每孔100个胰岛和等体积外分泌细胞同时培养。48 h后，收集各孔上清液，分别检测胰岛素含量及胰蛋白酶浓度；然后分别换低糖、高糖RPMI-1640培养液，行胰岛素释放实验。(2)体内实验：链脲佐菌素腹腔注射诱导BALB/c小鼠成为糖尿病小鼠。实验组(n＝10)和对照组(n＝10)分别于小鼠左肾被膜上下级同时移植胰岛细胞250个和等体积的胰腺外分泌细胞，术后实验组按腹腔注射A1AT 83 mg/kg(28 d)，对照组注射等量生理盐水(28 d)，同时两组小鼠分别按0.5 μg/g腹腔注射EDU(28 d)。1个月后切除左肾，免疫组织化学染色法检测左肾包膜下抗淀粉酶抗体的表达，免疫荧光染色法检测移植胰岛β细胞增殖情况，并继续检测血糖。
结果(1)纯化胰岛组胰岛素含量为(1.53±0.33) μg/孔，实验组为(1.26±0.13) μg/孔，对照组为(0.82±0.24) μg/孔，各组间的差异均有统计学意义(P<0.01)。纯化胰岛组胰蛋白酶浓度为(1.05±0.22) ng/ml，实验组为(2.42±0.44) ng/ml，对照组为(5.73±1.12) ng/ml，各组间的差异均有统计学意义(P<0.01)。纯化胰岛组胰岛素刺激指数为4.11±1.45，实验组为2.53±1.52，对照组为1.32±1.12，各组间的差异均有统计学意义(P<0.01)。(2)胰岛移植后，实验组和对照组血糖均降至正常，对照组较实验组血糖恢复正常时间延迟，组间差异有统计学意义(P<0.05)。切除两组小鼠左肾3 d后，两组小鼠随机血糖均>21 mmol/L。对照组移植物周围可见大量抗淀粉酶抗体阳性颗粒，实验组较对照组明显减少。免疫荧光检测显示实验组移植胰岛Insulin＋/EDU＋β细胞数较对照组明显增多。
结论(1)胰岛细胞与胰腺外分泌细胞在体外共同培养时加入A1AT可以缓解胰腺腺泡细胞分泌的蛋白酶对胰岛的破坏。(2)胰岛细胞与胰腺外分泌细胞共同移植在糖尿病小鼠体内，腹腔注射A1AT可以明显减少腺泡细胞胰蛋白酶的分泌，减轻胰腺外分泌细胞对移植胰岛的损伤，促进胰岛β细胞的增殖。