【摘 要】
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目的:探讨从石蜡包埋组织标本获取线粒体DNA(mtDNA)并进行PCR扩增的有效方法。方法:选取27例石蜡包埋的淋巴瘤组织,分别使用二甲苯/乙醇和0.5%Tween-20进行脱蜡,改进裂解缓冲
【机 构】
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蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室,蚌埠医学院病理学教研室,蚌埠医学院临床检验诊断实验中心
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目的:探讨从石蜡包埋组织标本获取线粒体DNA(mtDNA)并进行PCR扩增的有效方法。方法:选取27例石蜡包埋的淋巴瘤组织,分别使用二甲苯/乙醇和0.5%Tween-20进行脱蜡,改进裂解缓冲液的成分及浓度,酚/氯仿抽提以获取mtDNA并进行电泳和PCR分析。结果:0.5%Tween-20法获取mtDNA纯度及浓度含量明显高于二甲苯/乙醇法(P<0.01);二甲苯/乙醇法和0.5%Tween-20法获取的mtDNA PCR扩增成功率分别为11.1%和40.7%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:二甲苯/乙醇和0.5%Tween-20两种方法都可以扩增出mtDNA的目的片段,但0.5%Tween-20法操作简便,PCR扩增成功率高,不用接触二甲苯等有毒化学试剂,是一种较为理想的mtDNA提纯方法。
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