α-32P-DHBV DNA探针的制备及在检测鸭血清中的应用

来源 :中华实验和临床病毒学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:av437556057
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从含有PBR322-DHBV重组质粒的大肠杆菌菌株中提取鸭肝炎病毒(DHBV)DNA。通过缺口转移方法将国产的α-32p-dATP标记在DHBV DNA上,制成探针。此探针能够特异地与DHBV DNA杂交。利用斑点杂交方法可检测每个斑点中DHBV DNA的最小量为2pg。探针的同位素参入率为24~38.7%,最高放射比活为7×107cpm/µg DNA。用斑点杂交方法检测了高邮麻鸭雏鸭、成鸭以及北京鸭与樱桃谷鸭杂种雏鸭血清,这些鸭群的DHBV病毒血症的百分率分别为42%、50%和5.1%。鸭血清经电镜检测其结果与斑点杂交结果相符合。结果表明,DHBV DNA分子杂交方法是检测鸭子感染DHBV状况的一种可靠的、敏感的试验方法。

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