miR-196a在肝癌细胞中的表达及其促增殖作用

来源 :吉林大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:hackxingxing
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目的:探讨miR-196a在肝癌组织的表达水平和对肝癌Hep3B细胞增殖的影响,阐明其促进肝癌细胞增殖的可能机制。方法:收集20例肝癌组织及对应癌旁组织,培养人正常肝细胞株L02及肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2和Hep3B,采用qRT-PCR法检测miR-196amRNA在肝癌组织和对应癌旁组织及肝癌细胞株中的表达水平。取处于对数生长期人肝癌Hep3B细胞随机分为对照组、miR-196a mimics转染组和miR-196a inhibitors转染组,MTT法检测各组Hep3B细胞增殖活力,qRT-PCR法检测各组Hep3B细胞miR-196a的表达,流式细胞术检测各组Hep3B细胞周期变化,qRT-PCR和Western blotting法检测各组Hep3B细胞miR-196a潜在靶点叉头转录因子(FOXO1)的表达水平。结果:肝癌组织中miR-196amRNA表达水平明显高于相应癌旁组织(P<0.05);miR-196amRNA在人肝癌SMMC-7721、HepG2和Hep3B细胞中的表达水平明显高于人正常肝L02细胞(P<0.05)。与对照组比较,miR-196amimics转染组Hep3B细胞中miR-196amRNA表达水平明显升高(P<0.05),而miR-196ainhibitors转染组Hep3B细胞中miR-196amRNA的表达水平明显降低(P<0.05)。与对照组比较,miR-196amimics转染组Hep3B细胞增殖率明显升高(P<0.05),miR-196ainhibitors转染组Hep3B细胞增殖率明显降低(P<0.05),且呈时间依赖性。与对照组比较,转染24h时,miR-196ainhibitors转染组Hep3B细胞G0/G1期细胞百分率明显升高(P<0.05),S期细胞百分率明显降低(P<0.05)。与对照组比较,miR-196amimics转染组FOXO1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:miR-196a可能通过FOXO1促进肝癌细胞的增殖,提示miR-196a可能成为肝癌诊断和治疗的新靶点。
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