【摘 要】
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目的构建含EGFR基因siRNA腺病毒载体,并研究其对EL-4细胞株中EGFR基因表达的影响。方法合成双链寡核苷酸并克隆人pShuttleHl载体,pShuttleHl-siEGFR线性化后电转化到含pAdEasy-
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目的构建含EGFR基因siRNA腺病毒载体,并研究其对EL-4细胞株中EGFR基因表达的影响。方法合成双链寡核苷酸并克隆人pShuttleHl载体,pShuttleHl-siEGFR线性化后电转化到含pAdEasy-1的BJ5183感受态细菌中获取重组质粒,脂质体转染293细胞获取重组腺病毒Ad-siEGFR;TCID50法测定病毒效价;利用得到的重组腺病毒感染鼠EL-4细胞株,采用Western-blot检测感染前后EGFR蛋白表达水平的变化,观察AdHl/siEGFR对EL-4细胞EGFR表达的影响。
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