【摘 要】
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本试验旨在制备针对鸭维甲酸诱导蛋白Ⅰ（RIG-Ⅰ）全长蛋白的单克隆抗体。从鸭脾脏cDNA中扩增鸭RIG-Ⅰ基因N端长度均为900bp的a（1—900bp）和b（751—1650bp）2段基因片段,将其克隆入原
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,新疆农业大学动物医学学院
【基金项目】
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中央级公益性科研院所基本科研业务费（1610302014022）,地方科技攻关计划课题（PCI3S16）,“十二五”农村领域国家科技计划课题（2011AA100305-2）.
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本试验旨在制备针对鸭维甲酸诱导蛋白Ⅰ（RIG-Ⅰ）全长蛋白的单克隆抗体。从鸭脾脏cDNA中扩增鸭RIG-Ⅰ基因N端长度均为900bp的a（1—900bp）和b（751—1650bp）2段基因片段,将其克隆入原核表达载体pET-30a中;重组质粒转化BL21感受态细胞后,经IPTG诱导表达,将获得的目的蛋白免疫BALB/c小鼠,将其脾淋巴细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,并进行间接ELISA检测。结果显示,筛选出17株与分段表达的鸭RIG-Ⅰ蛋白有良好反应性的杂交瘤细胞株,测定单克隆抗体上清效价均为1∶5
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