【摘 要】
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目的 研究足细胞是否表达有功能的代谢型谷氨酸受体(mGluR).方法 以RT-PCR法检测墓因表达,Western印迹、免疫荧光双染色和免疫电镜检测蛋白质表达.酶免疫实验(EIA)、电泳迁移
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目的 研究足细胞是否表达有功能的代谢型谷氨酸受体(mGluR).方法 以RT-PCR法检测墓因表达,Western印迹、免疫荧光双染色和免疫电镜检测蛋白质表达.酶免疫实验(EIA)、电泳迁移位移实验(EMSA)和Western印迹法检测细胞环腺苷酸(cAMP)的产生和转录因子cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的活化.激光共聚焦显微镜观察细胞内游离钙的变化.结果 足细胞表达mGluR1和5的基因和蛋白质,肾小球中mGluR1的表达和足细胞标志蛋白synaptopodin表达共定位.免疫电镜显示mGluR1位于足细胞体和足突细胞膜下层.mGluR1和5的激动剂3,5-二羟基苯甘氨酸(DHPG)诱导足细胞快速地产生cAMP,转录因子CREB被激活,磷酸化CREB表达增高.这些改变能被mGluR1和5的选择性抑制剂1-氨基茚-1,5-二羧酸(AIDA)以及腺苷酸环化酶抑制剂(SQ22536)抑制,而2-氨基乙氧化联苯-甲硼烷(2APB)则不具有上述抑制作用.DHPG诱导足细胞内游离钙缓慢持续地增加,细胞孵育于不含钙的培养液中、AIDA预处理以及2APB预处理抑制了DHPG诱导的细胞内游离钙离子增加.结论 足细胞表达有功能的mGluR1和5.
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