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柔嫩艾美耳球虫子孢子酵母双杂交cDNA文库的构建

来源 :中国动物传染病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：energyjx

【摘 要】

：

为了筛选柔嫩艾美耳球虫子孢子入侵相关的蛋白,利用酵母双杂交体系构建了柔嫩艾美耳球虫子孢子酵母双杂交cDNA文库。提取纯化的子孢子总RNA,经MMLV-RT反转录合成cDNA第一链后

【作 者】

：

徐帅兵 黄兵 赵其平 董辉 朱顺海 崔晓霞 谢雨翔 唐敏 杨 

【机 构】

：

中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海师范大学生命与环境科学学院,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

【出 处】

：

中国动物传染病学报

【发表日期】

：

2016年6期

【关键词】

：

柔嫩艾美耳球虫 子孢子 酵母双杂交cDNA文库 同源重组 Eimeria tenella  sporozoite  yeast two-hybrid eDNA 

【基金项目】

：

国家自然科学基金（31272557,31572266）, 农业部中央级公益性科研院所项目（2015JB10）

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为了筛选柔嫩艾美耳球虫子孢子入侵相关的蛋白,利用酵母双杂交体系构建了柔嫩艾美耳球虫子孢子酵母双杂交cDNA文库。提取纯化的子孢子总RNA,经MMLV-RT反转录合成cDNA第一链后,利用LD-PCR扩增合成双链cDNA（ds cDNA）,dscDNA经纯化柱CHROMA SPINT＋TE-400 Columns纯化剔除小于200 bp的片段。将纯化后dscDNA、pGADT7-Rec及Carrier DNA共转化到已经制备好的酵母感受态细胞Y187中,dscDNA与pGADT7-Rec以同源重组的方式在细

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