非洲猪瘟病毒P54基因原核表达载体的构建与表达

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根据GenBank中非洲猪瘟病毒(ASFV)P54基因序列,设计合成了2对引物,采用PCR方法从ASFVDNA中分别扩增出了P54基因片段和经过改造的跨膜信号肽缺失的P54基因,将其克隆到表达载体pET28b中,构建了重组质粒pET-P54和pET-P54q,测序验证后转化入表达宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,表达产物经SDS—PAGE,Western-blotting检测。结果显示,经过改造的信号肽缺失的重组菌pET—P54q可表达出分子质量约24.5ku的重组融合蛋白,表达的蛋白以可溶形
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