研究抑癌基因DKK2在乳腺癌细胞中的表达及作用机制。
方法通过逆转录聚合酶链式反应（reverse transcriptase-polymerase chain reaction，RT-PCR）检测正常乳腺组织及乳腺癌（MDA-MB-231、MCF7）细胞中DKK2基因表达情况。通过转染DKK2质粒，让两株乳腺癌细胞稳定表达DKK2后。转染前细胞做为对照组加Vector标记，转染后细胞株作为实验组加DKK2标记。进一步通过实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）和Western-blot分析DKK2、Notch信号通路及其相关因子的表达。并通过细胞功能实验（克隆形成、流式细胞凋亡实验、Transwell实验）检测细胞增殖、凋亡、迁移能力。
结果DKK2在乳腺正常组织中高表达，而在乳腺癌细胞中（MDA-MB-231、MCF7）不表达。MDA-MB-231细胞转染前凋亡数为（2.57±1.18），转染后凋亡数为（49.53±8.27），转染后MDA-MB-231细胞相对转染前克隆形成率为20.44%，差异均具有统计学意义（P<0.005）。转染后的MCF7/DKK2细胞相对转染前的MCF/Vector细胞克隆形成率为15.21%，差异有统计学意义（P<0.005）。MB231/DKK2组细胞凋亡数为（49.53±8.27），MB231/Vector组细胞凋亡数为（2.57±1.18），差异具有统计学意义（P<0.005）。MB231/DKK2组迁移细胞数为（112.0±8.1），MB231/Vector组细胞迁移细胞数为（178.0±12.0），差异具有统计学意义（P<0.005）。以MB231/Vector组细胞Notch 1的mRNA表达记为1，MB231/DKK2组细胞Notch 1的mRNA表达为0.025 0，差异具有统计学意义（P<0.01）。MB231/Vector组细胞JAG1的mRNA表达记为1，MB231/DKK2组细胞JAG1的mRNA表达为0.289 1，差异具有统计学意义（P<0.005）。
结论转染不表达DKK2的这两株乳腺癌细胞株，使其过表达DKK2后可促进细胞凋亡来抑制其增殖，且细胞迁移受到抑制。说明DKK2可通过失活Notch信号通路来发挥抑癌作用。DKK2作为抑癌基因，可能成为乳腺癌早期诊断及治疗的靶基因之一。