【摘 要】
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背景与目的:SYUIQ-5是具有吲哚和喹啉结构的白叶藤碱衍生物,已有报道它能稳定和诱导G-四链体形成,抑制c-myc启动子和端粒酶活性.本实验主要研究SYUIQ-5对鼻咽癌细胞自噬的诱
【机 构】
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华南肿瘤学国家重点实验室,中山大学肿瘤防治中心实验研究部
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背景与目的:SYUIQ-5是具有吲哚和喹啉结构的白叶藤碱衍生物,已有报道它能稳定和诱导G-四链体形成,抑制c-myc启动子和端粒酶活性.本实验主要研究SYUIQ-5对鼻咽癌细胞自噬的诱导作用及其机制.方法:用免疫印迹法检测SYUIQ-5处理前后鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2和HONE1中微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、Akt、p-Akt以及自噬相关基因BNIP3(Bcl-2/adenocarcinoma E1819KD interacting protein 3)和Beclin1的蛋白表达水平.用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测鼻咽癌细胞中LC3和BNIF3的mRNA水平.用siRNA干扰BNIP3,检测BNIP3在SYUIQ-5诱导自噬过程中的作用.用共聚焦免疫荧光法观察FOX03a的定位.结果:用0.25～2.0μg/mL的SYUIQ-5处理鼻咽癌细胞CNE1、CNE2和HONE1 48 h,其LC3的表达在蛋白和mRNA水平均明显增强,且呈浓度依赖性.SYUIQ-5能显著抑制CNE2细胞的p-Akt水平,总的Akt表达基本无变化.用3 μg/mL SYUIQ-5作用CNE2细胞24 h后,共聚焦免疫荧光观察可见FOXO3a由细胞浆移位到细胞核.SYUIQ-5处理的鼻咽癌细胞中自噬相关基因BNIP3蛋白显著增加,而Beclin1无明显变化.用siRNA干扰BNIP3表达后,SYUIQ-5诱导的LC3-Ⅱ形成的功能受到抑制.结论:SYUIQ-5可能通过抑制Akt的激活,诱导FOXO3a移位到胞核,从而促进LC3的转录.诱导肿瘤细胞发生自噬性死亡.BNIP3也参与了SYUIQ-5诱导细胞自噬的过程.
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