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根据GenBank上已发表的NA－1株GPMV全序列设计并合成2对特异性引物，克隆得到GPMV的Leader及Tralier序列，与T7启动子、丁肝病毒核酶序列及T7终止子重叠PCR连接后，将连接产物克隆至改造的pVAX－1载体中，并用增强型绿色荧光蛋白基因代替GPMV的整个编码区，只保留与病毒复制、转录和病毒包装相关的调控序列，酶切、测序及荧光鉴定后，与pCI－NP、pCI－P及pCI－I。等3个辅助质粒共转染可表达T7RNA聚合酶的VT7细胞系，结果绿色荧光蛋白得到表达，表明成功构建了“拯救”病毒的微