论文部分内容阅读
目的
探讨小分子干扰RNA(siRNA)沉默脂酰辅酶A合成酶5(ACS5)基因对结肠癌细胞表达及增殖的影响。
方法采用免疫组化检测30例结肠癌及癌旁组织ACS5的表达。设计合成siRNA-ACS5,用Lipofectamine2000™搭载转染人结肠癌细胞HT-29、SW480,实时定量PCR检测ACS5 mRNA表达量,四唑氮化合物(MTS)法检测转染后结肠癌细胞增殖情况。
结果免疫组化显示结肠癌组织ACS5阳性率83.3%(25/30)明显高于癌旁组织30%(9/30)。结肠癌细胞HT-29 siRNA-ACS5干扰组的mRNA的表达量(0.18±0.03)显著低于空白对照组(2.48±0.12)和NC siRNA阴性对照组(2.55±0.31),抑制率92.96%(F=146.9,P<0.01)。结肠癌细胞SW480 siRNA-ACS5干扰组的mRNA的表达量(0.14±0.01)显著低于空白对照组(1±0.03)和NC siRNA阴性对照组(1.21±0.05),抑制率88.5%(F=826.59,P<0.01)。siRNA-ACS5干扰组在48、72 h的增殖能力明显低于两个对照组(P<0.05);而两个对照组在各时间点比较差异均无统计学意义(P>0.05)。
结论ACS在结肠癌组织中高表达,沉默ACS基因可下调结肠癌细胞ACS表达并抑制其增殖。