目的肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)是一类胞浆内富含Vitamin A脂滴的特殊类型的细胞,激活后的HSC胞浆中Vitamin A脂滴减少活消失,是研究肝纤维化疾病的良好素材。本研究欲改良HSC细胞的培养方法,并鉴别四种HSC细胞鉴定方法的有效性。方法采用含0.2 m M油酸的完全培养基对已培养传代的大鼠肝星状细胞进行培养。分别采用油红0染色、Vitamin A脂滴的紫外激发、a-SMA免疫组化、a-SMA免疫荧光四种方法对培养的HSC进行鉴定。结果用含0.2 m M油酸的完全培养基培养的大鼠肝星状细胞,细胞形态饱满,胞浆不因传代而减少,细胞形态维持稳定,油红O染色后可清晰显示未激活HSC内的脂滴;紫外激发下Vitamin A脂滴发出极易淬灭的蓝绿色荧光;以泡球蚴囊液为外源性刺激,使HSC激活,a-SMA免疫组化染色激活的HSC胞浆均可见棕黄色颗粒状沉淀;a-SMA免疫荧光显示激活的HSC细胞胞浆均可见FITC的激发的绿色荧光。结论含0.2 m M油酸的完全培养基可有效维持细胞形态。油红0染液、Vitamin A脂滴的紫外激发可有效鉴定未激活的HSC,a-SMA免疫组化、a-SMA免疫荧光方法是鉴别激活的HSC的有效方法。