【摘 要】
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目的体外模拟子痫前期胎盘缺氧的低氧环境培养滋养细胞,研究低氧对滋养细胞骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达的影响,以进一步深入研究OPN在子痫前期发病机制中的作用。方法利用
【机 构】
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暨南大学第二临床医学院,华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,深圳市易瑞生物技术有限公司
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目的体外模拟子痫前期胎盘缺氧的低氧环境培养滋养细胞,研究低氧对滋养细胞骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达的影响,以进一步深入研究OPN在子痫前期发病机制中的作用。方法利用气体混配缺氧装置(QT-MTX-3)模拟子痫前期的发生发展过程,配置不同氧浓度,采用细胞免疫组化和实时荧光定量PCR检测人胎盘绒毛膜癌滋养细胞系BeWo细胞在不同氧浓度下OPN蛋白及其mRNA的表达。结果①在不同氧浓度的环境下,显微镜观察BeWo细胞的生长情况,发现其对低氧反应敏感,细胞形态发生明显的改变。②细胞免疫组化检测结果显示:OPN在各组BeWo细胞中均有表达,其免疫反应产物主要表达定位于胞质和胞膜中;缺氧24h各组的OPN蛋白表达无明显变化;但低氧48h后,低氧组OPN蛋白的表达水平均明显下降,且2%O2组OPN蛋白下降更显著。③实时荧光定量PCR检测结果表明低氧对滋养细胞OPN mRNA的表达影响呈现出浓度时间依赖性,即随着氧浓度的降低和低氧时间的延长,OPN mRNA的表达呈显著下降趋势。结论低氧使BeWo细胞OPN的表达降低,且呈浓度时间依赖性,类似于OPN在子痫前期胎盘组织的表达随病情加重而进一步降低,这可能是子痫前期胎盘中缺氧对滋养细胞功能影响的重要机制之一。
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