【摘 要】
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目的 筛选重组抗CD52单克隆抗体CHO细胞株培养和连续灌流表达用培养基,以提高抗体表达量.方法 通过调整原有批培养用培养基中谷氨酰胺和植物水解蛋白,获得5种培养基配比.使用
【机 构】
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目的 筛选重组抗CD52单克隆抗体CHO细胞株培养和连续灌流表达用培养基,以提高抗体表达量.方法 通过调整原有批培养用培养基中谷氨酰胺和植物水解蛋白,获得5种培养基配比.使用模拟灌注方式进行细胞培养,分析细胞密度、活细胞比率和目标蛋白表达,筛选连续灌流细胞培养和表达用培养基.最后在7L反应器中采用灌注培养方式对筛选获得的培养基进行验证.结果 使用50 mL细胞培养管进行模拟灌注培养时,活细胞比率较高,达到90％以上;CHO细胞在添加谷氨酰胺至4.0 mmol/L和植物水解蛋白至5.0 g/L的批培养用培养基中生长速度最快;在基础培养基中抗体表达量比优化前高15％.20 d培养周期内,优化的培养基在7L反应器中可以维持CHO细胞密度在(2 727±253)万个/mL,活细胞比率在95％以上.结论 通过模拟灌注培养,筛选获得了一种在7L反应器灌流培养中适宜于重组抗CD52单克隆抗体CHO细胞表达的培养基.
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