聚磷激酶基因克隆及其植物表达载体构建

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利用试剂盒法提取最coliDHSct基因组DNA,根据GenBank中登录的大肠杆菌聚磷激酶(PPK)基因序列(IJ03719)设计引物,通过PCR扩增得PPK基因,然后将其克隆到pMD20-TVector上并测序,测序结果与GenBank登录的序列相比对,同源性达99.9%。用限制性内切酶XbaI、BamHI将目的片段和植物表达载体pBll21进行双酶切,T4连接酶连接,然后转化到E.coliBL21感受态细胞,获重组植物表达载体pBl21-PPK,从而为研究转PPK基因植物的聚磷能力奠定基础。
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