高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法测定海产品中5种硒形态的含量

来源 :理化检验-化学分册 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanhan069
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制备好的冻干海产品样品0.2 g(精确至0.000 1 g)在pH 8.0的水溶液体系下,经30 mg木瓜蛋白酶(800 U·mg-1)在50℃、180 r·min-1的条件下酶解12 h,涡旋3 min,离心10 min。所得的上清液经0.22μm滤膜过滤,以Agilent ZORBAX SB-AQ色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm)为固定相,10 mmol·L-1的柠檬酸溶液(pH 4.75)为流动相,于0.6 mL·min-1下等度洗脱,可在11 min内实现对5种硒形态的分离,再采用电感耦合等离子体质谱法测定硒酸盐(Se6+)、亚硒酸盐(Se4+)、甲基硒代半胱氨酸(Me-Se-Cys)、硒代蛋氨酸(Se-Met)和硒代乙硫氨酸(Se-Et)的含量。结果表明,5种硒形态标准曲线的线性范围均在500μg·L-1内,检出限(3S/N)为1.231~2.423μg·L-1。按标准加入法对海产品样品进行3个浓度水平的回收试验,回收率为81.3%~118%,测定值的日内相对标准偏差(n=6)和日间相对标准偏差(n=6)均小于9.0%。方法用于市售海产品分析,结果表明小黄鱼和带鱼中硒代蛋氨酸的测定结果比文献报道的大西洋鲑鱼和大西洋鳕鱼的测定值都要高,说明在我国食用小黄鱼和带鱼能够为居民补充较高水平的硒代蛋氨酸。此外,口虾蛄也是补充硒代蛋氨酸的重要来源。
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