【摘 要】
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目的 克隆得到山茱萸Cornus officinalis萜类合成途径的关键酶CoHMGS基因的cDNA序列,并进行相应的生物信息学分析,为深入研究CoHMGS基因的功能奠定基础.方法 以山茱萸转录组筛选出的c102453_g2序列为参考序列设计特异引物,以山茱萸叶片总RNA,通过RT-PCR扩增获得CoHMGS基因序列,序列纯化回收后连接到pTOPO-T载体上,转化至大肠杆菌DH10B,选取阳性克隆测序.利用生物信息学软件预测CoHMGS基因及其编码蛋白质的功能.结果 克隆得到长度为1645bp的CoHM
【机 构】
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河南科技大学农学院,河南洛阳471023;洛阳市道地药材繁育与创新利用工程技术研究中心,河南洛阳471023;南阳市山茱萸研究所,河南南阳474550
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目的 克隆得到山茱萸Cornus officinalis萜类合成途径的关键酶CoHMGS基因的cDNA序列,并进行相应的生物信息学分析,为深入研究CoHMGS基因的功能奠定基础.方法 以山茱萸转录组筛选出的c102453_g2序列为参考序列设计特异引物,以山茱萸叶片总RNA,通过RT-PCR扩增获得CoHMGS基因序列,序列纯化回收后连接到pTOPO-T载体上,转化至大肠杆菌DH10B,选取阳性克隆测序.利用生物信息学软件预测CoHMGS基因及其编码蛋白质的功能.结果 克隆得到长度为1645bp的CoHMGS序列,包含1413bp的完整开放阅读框,编码470个氨基酸.蛋白整体带负电荷,为不稳定亲水性蛋白,定位于细胞质内,不含跨膜结构.结论 首次克隆得到山茱萸CoHMGS基因,对其编码蛋白质进行了初步的分析和预测,为深入揭示CoHMGS基因在山茱萸萜类物质合成途径中的功能奠定了基础.
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