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目的
研究微小RNA(miR)-211对肝癌细胞恶性表型的影响,鉴定其下游直接靶基因,探讨miR-211调控肝癌细胞的分子机制。
方法用实时荧光定量RT-PCR技术检测20对肝癌及癌旁组织中miR-211的表达水平;用Transwell侵袭实验检测miR-211对肝癌细胞QGY-7703及HepG2侵袭能力的影响;通过生物信息学方法,筛选miR-211可能的靶基因,并利用荧光报告载体实验结合Real-time RT-PCR和Western blot技术验证miR-211对其靶基因的直接调控作用;用Transwell侵袭实验研究靶基因的具体功能。两组间差异比较用t检验。
结果miR-211在肝癌组织中表达明显上调(t = 6.26, P < 0.01);miR-211增强肝癌细胞的侵袭能力(t值分别为12.59、17.82,P值均< 0.01)。筛选并证实了miR-211发挥作用的直接靶基因,雌激素受体α,且敲降雌激素受体α可促进肝癌细胞的侵袭(t值分别为8.99、29.31,P值均< 0.01)。
结论miR-211可靶定雌激素受体α而促进肝癌细胞的侵袭能力。