【摘 要】
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类钙调磷酸酶B互作蛋白激酶(calcineurin B-like interacting protein kinase,CIPK)是植物中广泛存在的一类参与解码钙信号的丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr)蛋白激酶,在植物非生物与
【机 构】
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西北农林科技大学 生命科学学院,旱区作物逆境生物学国家重点实验室,杨凌 712100
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类钙调磷酸酶B互作蛋白激酶(calcineurin B-like interacting protein kinase,CIPK)是植物中广泛存在的一类参与解码钙信号的丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr)蛋白激酶,在植物非生物与生物逆境信号转导中起着重要作用.本研究在甘蓝型油菜(Brassica napus)中通过逆转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)克隆获得BnaCIPK2(GenBank No.KF169730)与BnaCIPK16(GenBank No.MK571826)基因的cDNA序列.序列分析表明,BnaCIPK2和BnaCIPK16基因的开放阅读框分别为1389和1386 bp,编码氨基酸残基分别为463与461个,这2个BnaCIPK基因编码的蛋白含有保守的激酶结构域与天冬酰胺-丙氨酸-苯丙氨酸(asparagine-alanine-phenylalanine,NAF)基序.亚细胞定位结果显示,2个CIPK蛋白主要分布于细胞质与细胞核.qRT-PCR结果显示,茉莉酸(jasmonic acid,JA)、冷害以及聚乙二醇(PEG8000)显著诱导BnaCIPK2的表达,百草枯(methyl viologen,MV)处理24 h后极显著抑制BnaCIPK2的表达;水杨酸(salicylic acid,SA)、热害、冷害、双氧水(H2O2)和PEG8000可诱导BnaCIPK16的表达量上调,JA和脱落酸(abscisic acid,ABA)处理则导致BnaCIPK16的表达量下调.酵母双杂交(yeast two-hybrid,Y2H)与双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)结果表明,BnaCIPK2与油菜钙调磷酸酶B4蛋白(Brassica napus calcineurin B-like protein 4,BnaCBL4)、BnaCIPK16与BnaCBL3存在互作.本研究为阐明BnaCIPK2与BnaCIPK16的功能与调控机制提供了基础资料.
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