应用免疫蛋白质组学方法鉴定弓形虫病诊断抗原分子的研究

来源 :中国病原生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yogonet
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的 鉴定对弓形虫感染具有潜在诊断价值的弓形虫抗原分子.方法 制备刚地弓形虫RH株速殖子全虫可溶性蛋白及弓形虫感染小鼠腹腔蛋白,经SDS-PAGE分离后采用半干电转移方法将其转移到硝酸纤维素膜上,再分别与22份弓形虫感染者血清进行Western blot,以22份健康人血清和其他寄生虫病患者血清作为对照,筛选能被弓形虫感染者血清特异性识别的蛋白组分;两种蛋白样本经二维电泳分离后采用Western blot筛选能被弓形虫感染者混合血清识别,但不能被健康人血清及其他寄生虫病患者血清识别的特异性斑点.切取SDS-PAGE胶上相应的特异性蛋白质斑点进行MALDI-TOF分析,鉴定蛋白斑点的基因.结果 一维电泳及Western blot结果显示,弓形虫感染小鼠腹腔蛋白中的90、37、30、28和18 ku组分分别可被部分弓形虫感染者血清识别,其中为28 ku蛋白能被22份弓形虫感染病人血清中的15份所识别;速殖子全虫可溶性虫体蛋白中的90、70、67、56、48、39、37、30、28和18 ku组分可被部分弓形虫感染者血清识别,其中28 ku蛋白可被22份弓形虫感染者血清中的21份识别,22份健康人血清中有2份与28 ku蛋白呈弱阳性反应,与其他寄生虫病患者血清无交叉反应.二维电泳Western blot阳性斑点的飞行质谱分析显示,弓形虫感染小鼠腹腔蛋白中的28 ku组分为磷酸丙糖异构酶,弓形虫速殖子全虫可溶性蛋白中的28 ku组分为GRA2和GRA7.结论 弓形虫抗原与宿主抗体反应具有高度异质性,GRA2、GRA7及磷酸丙糖异构酶等分子的弓形虫感染者血清识别率高,此三种蛋白可作为建立具有高敏感性的弓形虫病特异性免疫诊断方法的抗原分子.
其他文献
本文利用高分辨率层序地层学、沉积学和井-震联合储层反演技术,对塔里木盆地塔中地区志留系下沥青砂岩段砂体分布进行了研究,对塔中地区志留系沉积相、层序地层格架,以及重点
目的 研究噬菌体ZZ1对小鼠的安全性及药代动力学. 方法 尾静脉1次大剂量注射高浓度去内毒素ZZ1悬液,观察小鼠反应状态,检测活性ZZ1在各组织中的浓度变化及小鼠血清抗ZZ1中和
目的研究肿瘤科患者感染鲍曼不动杆菌的耐药性变化情况及耐药机制,为临床治疗及耐药性控制提供指导。方法收集2012年1月-2014年12月本院肿瘤科患者临床标本培养,挑取单菌落进
大部分球菌主要引起化脓性炎症,研制疫苗防治该类细菌是当前研究的热点领域之一。乳球菌是一种新型疫苗载体,本文综述了乳球菌介导的肺炎链球菌、化脓链球菌、无乳链球菌和金
本文介绍了鄂尔多斯西南缘陇县地区中奥陶统平凉组内潮汐沉积的研究现状,介绍了岩性特征及沉积相分析的原理,介绍了内潮汐沉积的特征。
目的研究自然杀伤细胞G2D受体在乙肝患者体内差异表达及其临床意义。方法选取2012年5月~2013年5月在本院就诊的30例慢性肝炎患者,21例重型肝炎患者及非乙肝对照18例,用流式细
笔者以胜利油区的车镇凹陷和南阳油区的泌阳凹陷为例,应用各种地质、物探、地化资料,针对持续型陡坡带砂砾岩体地层划分对比难度大、地质结构复杂、油气有效储层预测精度低的
会议
目的 建立一种快速检测布鲁氏菌抗体的新方法. 方法 利用胶体金免疫层析技术,以大肠埃希菌表达、纯化的OMP31与BP26重组蛋白作为检测抗原,以金黄葡萄球菌A蛋白(SPA)作为胶体
本文研究了高邮凹陷北斜坡中部阜宁组阜三段碎屑岩储层特征,阜宁组三段储层中砂岩类型以细砂岩、粉细砂岩及粉砂岩为主,砂岩碎屑含量为75%~95%,填隙物含量为5%~25%,孔隙度为3%~35%,平
目的应用空间流行病学方法分析2009~2012年全国急性血吸虫病疫情特征,探索回顾性时空重排扫描统计量在急性血吸虫病聚集性探测中的应用。方法收集2009~2012年全国急性血吸虫