【摘 要】
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目的:探讨表皮生长因子(EGF)在成年猴中枢神经系统的分布规律及功能.方法:健康成年雄性恒河猴(体重5kg)1只,肌肉注射麻醉后开胸,Zamboni液(4%多聚甲醛-15%苦味酸-PBS,pH 7.2~7
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目的:探讨表皮生长因子(EGF)在成年猴中枢神经系统的分布规律及功能.方法:健康成年雄性恒河猴(体重5kg)1只,肌肉注射麻醉后开胸,Zamboni液(4%多聚甲醛-15%苦味酸-PBS,pH 7.2~7.4)心脏灌注固定后,取脊髓及脑组织各部位入Zamboni液后固定,再放入30%蔗糖溶液至组织块沉底,20μm厚连续冰冻切片每10张取1张,漂洗后经3% H2O2处理30min以封闭内源性过氧化物酶活性,0.3% Triton X-100/0.1%封闭用羊血清(0.01M PBS配)室温封闭1h后,与一抗EGF特异性抗体(工作浓度为1∶100)置4℃冰箱孵育24h,二抗和SP复合物均于室温孵育1h,DAB显色.对照以无一抗的0.01MPBS代替EGF一抗,余操作步骤不变,结果为阴性.
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