牛分枝杆菌广西分离株MPB70基因的克隆及序列分析

来源 :中国奶牛 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tandge

【摘要】

：

利用牛分枝杆菌MPB70基因特异性引物,以2株牛分枝杆菌广西分离株的染色体DNA为模板,扩增MPB70基因,产物经纯化后与载体PMD18-T连接,然后转化至大肠杆菌DH5α。提取转染后大肠

【作者】

：

谢志勤谢芝勋刘加波黄小武张振荣

【机构】

：

广西兽医研究所,广西柳州市动物疾病预防诊断中心,广西武宣动物疾病预防诊断中心

【出处】

：

中国奶牛

【发表日期】

：

2010年11期

【关键词】

：

牛分枝杆菌 MPB70基因 PCR 序列分析 Mycobacterium bovine MPB70 gene Polymerase chain reaction

【基金项目】

：

新世纪百千万人才工程国家级人选专项基金（945200603）, 国家农业公益性专项（200803026）, 广西壮族自治区科技攻关项目（桂科转0626001-5-1）, 广西壮族自治区水产畜牧局科研计划（桂鱼牧科[08]283-20）

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利用牛分枝杆菌MPB70基因特异性引物,以2株牛分枝杆菌广西分离株的染色体DNA为模板,扩增MPB70基因,产物经纯化后与载体PMD18-T连接,然后转化至大肠杆菌DH5α。提取转染后大肠杆菌的质粒进行双酶切和PCR鉴定,鉴定为阳性的质粒进行序列测定。测序后通过序列分析软件DNAstar MegAlign对MPB70基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行分析,并与GenBank上已发表的8株牛分枝杆菌的MPB70基因参考序列进行比较。结果显示广西分离株mt359、mt370与已发表的7株参考株序列比较,其核

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