哺乳动物耳蜗感觉上皮细胞长期培养体系的建立及临床意义

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目的建立哺乳动物耳蜗感觉上皮细胞(CSEC)长期培养体系,为内耳毛细胞再生、分子及基因研究提供细胞来源。方法取1d龄wistar大鼠耳蜗感觉上皮作组织块培养,有限稀释法纯化并得到CSEC单克隆细胞系。胰蛋白酶+胶原酶消化培养传代,传25代。取第25代CSEC,在倒置显微镜、透射电镜下对CSEC的生长特征、形态结构进行观察;免疫细胞化学检测细胞角蛋白18、波形蛋白,鉴定CSEC细胞来源。免疫荧光细胞化学、RT—PCR检测毛细胞标志物Brn.3a、Calretinin及AchRa9、MyosinVllamRN
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