新塔花实时定量PCR内参基因的筛选和验证

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目的:筛选出新塔花在不同组织(根、茎、叶、花)及脱落酸(ABA)处理不同时间的叶片中表达相对稳定的内参基因.方法:从新塔花转录组数据中搜索到5个看家基因ZbIF3Gl、ZbGAPDH1、ZbEFlγ、ZbUBC9、ZbTUBα,将其作为新塔花相对实时定量PCR候选内参基因,并设计内参引物.利用实时荧光定量PCR获得5个候选内参基因的Ct值,通过3种基于不同算法的软件(GeNorm、NormFinder和BestKeeper)对内参基因稳定性进行分析.结果:ZbGAPDHl、ZbEFly的表达相对更为稳定,适合作为新塔花不同组织及ABA处理的基因表达研究的内参基因,并用新塔花ZbFLS、ZbCHI基因的表达分析实验进一步验证了上述预测.结论:确定ZbGAPDH1与ZbEFlγ为适合用于新塔花定量分析的内参基因,该研究为新塔花后续相关基因表达研究奠定了基础.
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