【摘 要】
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目的:通过优化树鼩原代肝细胞的分离及体外培养条件,获得能够在体外进行长期稳定培养的树鼩原代肝细胞。方法:优化肝脏灌流液、酶消化液及细胞离心速度等原代肝细胞分离条件,
【机 构】
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昆明理工大学生命科学与技术学院,中国医学科学院/北京协和医学院昆明医学生物学研究所,重庆市科学技术研究院重庆生物技术研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81260248),国家重大基础研究计划(973)项目(2009CB522502),国家科技支撑计划项目(2011BAI15B01-21,2012BAI39B01)的支持
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目的:通过优化树鼩原代肝细胞的分离及体外培养条件,获得能够在体外进行长期稳定培养的树鼩原代肝细胞。方法:优化肝脏灌流液、酶消化液及细胞离心速度等原代肝细胞分离条件,培养细胞密度和培养基配方等原代肝细胞培养条件,用台盼蓝染色细胞计数法、MTT检测法及EDU标记法评价所分离、培养树鼩原代肝细胞的数量、活力及生长状态。结果:添加葡萄糖的D-Hank’s液作为灌流液,含有0.005 mol/L CaCl2及12 ×104 units/L胶原酶IV的D-Hank’s液作为消化液,37℃消化15~2
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