【摘 要】
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目的筛选、鉴定与ubiquilin 4相互作用的蛋白,探讨ubiquilin 4在肿瘤发生、发展中的作用机制。方法利用细胞免疫荧光技术,确定外源及内源ubiquilin 4在MKN45细胞中的定位;构
【机 构】
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国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院检验科,煤炭总医院检验科,国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院病因室/分子肿瘤学国家重点实验室/癌发生及预防分子机理北京市重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金（81472208）, 中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目（2016-I2M-1-001）
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目的筛选、鉴定与ubiquilin 4相互作用的蛋白,探讨ubiquilin 4在肿瘤发生、发展中的作用机制。方法利用细胞免疫荧光技术,确定外源及内源ubiquilin 4在MKN45细胞中的定位;构建含有UBQLN4和GST标签的原核表达载体p GEX-UBQLN4,将其转化至大肠杆菌中,6 h后收集蛋白。运用标签纯化ubiquilin 4,利用GST-pull down技术寻找差异条带,再进一步应用蛋白质谱技术鉴定蛋白,并通过免疫共沉淀法进行验证。结果免疫荧光显微镜显示,外源及内源ubiquilin
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