【摘 要】
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目的:克隆和表达日本血吸虫SJCHGC02377蛋白.方法:采用RT-PCR从日本血吸虫成虫总RNA中扩增出编码SJCHGC02377蛋白的基因片段;经克隆和测序分析后,亚克隆至表达载体pET-23a(+)
【机 构】
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湖南师范大学医学院分子生物学研究室,湖南,长沙,410013
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目的:克隆和表达日本血吸虫SJCHGC02377蛋白.方法:采用RT-PCR从日本血吸虫成虫总RNA中扩增出编码SJCHGC02377蛋白的基因片段;经克隆和测序分析后,亚克隆至表达载体pET-23a(+),转化大肠埃希菌BL21,菌落PCR和双酶切鉴定;阳性菌株经IPTG诱导表达SJCHGC02377蛋白部分片段,亲和层析予以纯化.结果:RT-PCR扩增出SJCHGC02377蛋白基因片段;获得的阳性克隆序列与GenBank中登录的日本血吸虫SJCHGC02377蛋白的基因序列一致;SJCHGC02377蛋白基因被亚克隆到原核表达载体pET-23a(+),在BL21中获得了表达,表达的蛋白经亲和层析获得纯化.结论:成功构建了日本血吸虫SJCHGC02377蛋白的重组表达质粒,在大肠埃希菌中获得表达.
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