【摘 要】
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人溶菌酶是由130个氨基酸组成的碱性多肽,具有抗菌、抗病毒和增强免疫力的功能,对生物体的自身防御起着重要作用.为研究乳腺生物反应器表达重组人溶菌酶和提高牛奶的免疫活性
【机 构】
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中国农业大学农业生物技术国家重点实验室; 北京基因达科技有限公司; 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室 北京 100094; 北京 100094; 北京 1
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人溶菌酶是由130个氨基酸组成的碱性多肽,具有抗菌、抗病毒和增强免疫力的功能,对生物体的自身防御起着重要作用.为研究乳腺生物反应器表达重组人溶菌酶和提高牛奶的免疫活性,制备了以溶菌酶基因组序列为目标基因的表达载体的转基因小鼠模型.经转基因小鼠的制备,通过PCR和Southern blot检测,从83只出生小鼠中获得6只整合人溶菌酶融合基因的转基因小鼠.对F1代小鼠的PCR检测表明外源基因可以遗传给后代.在3只转基因阳性母鼠的乳汁中,用Western blot方法可以检测到重组人溶菌酶的存在,最高表达量达到0.2 mg/mL.经活性检测,转基因小鼠乳清的溶菌酶活性显著提高,已达到人乳清溶菌酶活性的0.4倍,而非转基因小鼠乳清具有极低的溶菌酶活性.尽管转基因小鼠乳清中重组人溶菌酶活性还低于人乳清中溶菌酶活性,但是转基因小鼠乳汁中的重组人溶菌酶与人溶菌酶具有相同的比活力.为乳腺生物反应器表达重组人溶菌酶的研究和开发应用打下了坚实的基础.
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